Procedura Operativa Standard

- OGGETTO

Validazione Biologica dell’autoclave

- OBIETTIVO/SCOPO

Accertamento del corretto andamento del ciclo di sterilizzazione a vapore

- TERMINOLOGIA

Bioburden, SAL, D, z, °C, sterilizzazione, vapore saturo, Bacillus stearo­thermophylus

- DOCUMENTAZIONE DI RIFERIMENTO

Manuale di Istruzione Autoclave

Istruzioni indicatori biologici

- RESPONSABILITA’

Direttore Laboratorio di Microbiologia

- SICUREZZA

Tutte le manipolazioni devono essere eseguite indossando i DPI (camice, guanti, occhiali,etc.)

- MATERIALE

Indicatore biologico “Prospore II”

Incubatore

Sacchetti neutralizzazione indicatori biologici

- PROTOCOLLO

1. Introdurre nella camera di sterilizzazione in posizioni differenti, con il materiale da sterilizzare, almeno due (tre se si sterilizzano rifiuti sanitari) fiale di “Prospore II” identificate, aventi lo stesso numero di lotto (localizzare i punti più critici, ad es. vicino alla scarico).

2. Una terza (o quarta) fiala, avente lo stesso numero di lotto, non viene sottoposta a trattamento di ste­rilizzazione per costituire il “ controllo positivo” al fine di accertare la vitalità delle spore e le corrette prestazioni del terreno nutritivo.

3. Ultimato il ciclo di sterilizzazione programmato (attendere almeno 10 minuti per il raffreddamento): – chiudere il tappo della fiala premendo fortemente verso il basso – rompere le fiale in vetro contenenti il terreno delle provette sottoposte a ciclo di sterilizzazione e di quella non trattata premendo con una pinzetta.

4. Incubare a seconda del tipo di “Prospore II” per i tempi e temperature indicate.

-NON CONFORMITA’ -

ARCHIVIAZIONE

I risultati vanno riportati nell’apposito registro di validazione dell’autoclave con firma dell’opearatore com­pleti di modello e numero di matricola dell’autoclave, data, tempo e temperatura (in °C) del ciclo di steriliz­zazione, lotto dell’indicatore e temperatura d’incubazione

- OGGETTO

Monitoraggio ambientale in ambienti a rischio di aspergillosi invasiva del polmone ed altre malattie di origine micetica.

- OBIETTIVO

Evidenziare e localizzare possibili fonti di inquinamento per un immediato intervento correttivo.

- RESPONSABILITA’

Capo Sala – Responsabile Reparto Terapia Intensiva – Microbiologo

- MEZZI NECESSARI

Strumentazione

• Campionatore microbiologico d’aria. Fare riferimento al Manuale “Monitoraggio microbiologico dell’ambiente” per la manutenzione ed alla scheda di registrazione per la calibrazione periodica in accordo alle norme EN 45001.

• Software specifico per la registrazione dati di campionamento, risultati grezzi ed elaborazione dati per risultati finali.

Materiale

Piastre a contatto con terreno nutritivo Sabouraud Dextrose Agar.

- PROTOCOLLO

Controllo Strumentazione

Prima di iniziare il campionamento, accertarsi che la batteria del campionatore sia sufficientemente carica per aspirare il volume totale d’aria prefissato. Se ciò non si verifica, dotarsi di una seconda batteria carica per la sostituzione sul campo.

Impiego Campionatore

Disinfettare la testata dello strumento prima di ogni ciclo di campionamento, trattando la parte interna ed esterna con disinfettante spray o salviettina disinfettante. La testata, protetta dalla copertura in resina plastica, può essere sterilizzata in autoclave a 121° C per 20 minuti. Avere a disposizione almeno 3 testate pronte all’uso. In alternativa disinfettare lo strumento con un aerosol disinfettante mantenuto a circa 30 cm dalla testata mentre l’aspirazione è in funzione per circa 30 secondi.

Svitare la testata dallo strumento trattenendola sul bordo.

Evitare di toccare con le mani sia la parte interna che esterna dell’area forellata.

Inserire una piastra “Surfair” nel suo alloggiamento dello strumento e poi togliere il coperchio in plastica.

Fare attenzione che la piastra non abbia goccioline di condensa: se necessario, lasciare asciugare per qualche minuto le piastre a contatto sotto il flusso laminare sterile prima del loro impiego.

Riavvitare la testata al campionatore ed iniziare il ciclo di aspirazione dell’aria.

Ultimato il ciclo, svitare la testata, applicare il coperchio alla piastra a contatto ed estrarla.

Accertarsi che ogni piastra a contatto sia identificata correttamente con i necessari dati di campionamento.

Capovolgere la piastra, trasferirla in termostato incubatore alla temperatura e per il tempo richiesto dal terreno nutritivo specifico impiegato.

Calcolo dei Risultati

Al termine del periodo di incubazione le colonie (Unità Formanti Colonia) sono visibili ad occhio nudo sulla superficie agarizzata delle piastrine a contatto. Esiste una probabilità statistica che 1 U.F.C. sia costituita da più di un microrganismo originale in quanto microrganismi aspirati in successione potrebbero essersi sovrapposti sulla superficie del terreno. Si applica pertanto un fattore correttivo come da (vedi Tabella istruzioni). Per il calcolo finale del numero di microrganismi rapportare il numero totale di colonie contate e corretto per ogni piastrina al volume d’aria aspirata e riportare i risultati in U.F.C (Unità Formanti Tallo = UFT nel caso di muffe). per 1 metro cubo d’aria (=1000 litri di aria).

Piano di Campionamento

Prelevare in triplo campioni:

A. All’esterno dell’edificio

B. All’interno dell’ambiente considerato

C: Negli altri ambienti non a regime di contaminazione micetica controllata dell’ospedale

Campionamento esterno

Eseguire una serie di quattro campionamenti per tre giorni consecutivi, alla mattina ed alla sera, nelle vicinanze della presa d’aria dell’impianto di ventilazione o condizionamento per avere una visione generale e comparativa della popolazione fungina esterna.

Campionamento interno

Eseguire campionamenti al centro di ogni ambiente confinato ed a trenta centimetri dai bocchettoni di uscita dei condotti dell’aria condizionata/ventilazione.

Il campionamento dell’aria dovrebbe essere completato con l’esame di pareti/superfici con le piastre a contatto.

• Interpretazione risultati

Ordinare e raffrontare in ordine progressivo i livelli micetici riscontrati

1. All’esterno

2. Nell’ambiente “FSCV”

3. Negli ambienti non a regime di contaminazione micetica controllata. Ciò ci permetterà di evidenziare:

• Malfunzionamento o manutenzione inadeguata del sistema di filtrazione

• Interruzione della pressione positiva

• Localizzazione di fonti esterne di contaminazione

• Inadeguato addestramento del personale medico e paramedico

In linea di principio gli ambienti “FSCV” dovrebbero avere un contenuto micetico dell’ordine di una magnetudine inferiore a quello esterno.

Linee Guida per la valutazione degli ambienti “FSCV”

Miceti Patogeni Opportunistici <1 ufc/m3

Miceti Totali a 20°C <15 ufc/m3

Miceti Totali a 37°C <2 ufc/m3

• Riferimento

IAQ Microbiology Reference Guide – Fungal Spore Control Ventilation in Hospital – Aerotech-Kalmar Laboratories – 1998.

L’intervista è spesso uno degli aspetti più difficili che l’uditore deve affrontare.

Tra l’altro l’intervista è anche uno dei punti più importanti di un “audit”.

L’auditore dovrebbe essere in grado di adottare differenti tecniche per ottenere le informazioni senza mettere in difficoltà l’”audito”.

Il modo con il quale l’auditore inizia il processo di intervista può determinare il successo o meno dell’intervista stessa.

Intervista rilassata e conversazionale

L’intervista dovrebbe essere condotta con relax ed in modo conversativo.

L’auditore non deve semplicemente attenersi alla checklist che ha in dotazione. Dovrebbe invece cominciare ad interessarsi della posizione e dei compiti dell’intervistato.

Dopo poco l’intervistato avrà certamente richiamato un argomento che è di interesse per l’auditore, il quale chiederà maggiori informazioni sull’argomento stesso.

A questo punto, il processo di audizione scorrerà più facilmente e l’auditore potrà passare ad altri importanti argomenti e richiesta di documenti a comprova del Sistema Qualità.

La focalizzazione dell’auditore dovrà essere quella di comprendere il processo ed il ruolo della persona in quel processo. Se l’oggetto si sposta dal processo alla checklist, la conversazione e le informazioni che l’auditore cerca diventeranno difficili, potendo creare anche problemi di tipi psicologico.

Le domande “chiuse” e le domande “aperte”.

Cose che l’auditore dovrebbe chiedere          Cose che l’auditore non dovrebbe chiedere

Conclusione

Il processo di “audit” non deve essere interpretato come un esame sia parte dell’auditore (professore) e dell’audito (scolaro), ma come un processo di miglioramento del Sistema Qualità a vantaggio di tutti.

A

Accuratezza – Grado di concordanza tra il risultato di una misurazione ed il valore vero del misurando.

Autocalibrazione – Calibrazione automatica con l’impiego di una massa campione esterna.

Autozero – Sistema automatico che permette l’azzeramento della bilancia senza intervento manuale.

B

Bilancia a due piatti – Confronto di due masse gravitazionali. All’equilibrio, le due forze peso sono uguali e sono quindi uguali le quantità di materia poste sui due piatti. E’ una leva di 1° genere costituita da un giogo a bracci uguali con fulcro al centro; alla estremità del giogo sono appesi due piattelli.

Bilancia a compensazione elettromagnetica – Confronto tra una massa gravitazionale ed una forza elettromagnetica. L’azione della forza peso agente su un corpo viene bilanciata da una forza elettromagnetica generata da una corrente immersa in un campo magnetico, prodotto da un magnete permanente.

Bilancia analitica – Consente di determinare la massa con l’approssimazione di 1 mg.

Bilancia idrostatica – Permette di misurare la densità relativa di un campione sia solido che liquido sfruttando il principio di Archimede secondo cui “un corpo immerso in un fluido riceve una spinta dal basso verso l’alto pari al peso del volume di fluido spostato”.

Bilancia tecnica – Consente di determinare la massa con un approssimazione massima di 0,01 grammi.

C

Calibrazione bilance elettroniche – Operazione che consiste nel far memorizzare allo strumento il valore nominale di una massa campione pari al fondo scala dello strumento stesso.

Carica elettrostatica – La presenza di elettricità statica sulla superficie del corpo da pesare può essere causa di sensibile errore.

Certificato di taratura – Documento dove sono riportati ripetibilità, eccentricità del carico, scostamenti dalla linearità, incertezza espansa di taratura; temperatura, data, luogo etc.

Calibrazione esterna – Operazione di calibrazione che deve essere eseguita posizionando manualmente pesi certificati sul piattello di pesata.

Calibrazione interna – Funzione della bilancia che consente il posizionamento interno automatico sulla cella di carico di una massa di riferimento per l’autocalibrazione.

Certificazione – Controllo ufficiale di una bilancia che attesta che lo strumento ha soddisfatto le condizioni della certificazione in rispetto delle caratteristiche costruttive e metrologiche ed in particolare in conformità con i limiti di tolleranza della calibrazione.

Classe di accuratezza delle bilance – In conformità alla linee guida internazionali EC e OIML , le bilance sono classificate: Bilance ad alta capacità = IIII; bilance commerciali = III; bilance di precisione = II; bilance di alta precisione = I.

Ct – Carati.

G

Gravità – Forza di gravità direttamente correlata all’accelerazione di gravità. Essa è in funzione della distanza che esiste tra noi ed il centro della Terra.

I

Indicatore di livello – Sistema utilizzato per posizionare in piano la bilancia. E’ tradizionalmente costituito da una bolla d’aria in un liquido.

ISO – International Organisation for Standardisation.

L

lb – Libra=454 grammi.

LCD – Liquid Crystal Display. Visualizzatore a cristalli liquidi.

Linea a piombo – Mezzo utilizzato per mettere in piano la bilancia.

Linearità – Scostamento tra curva caratteristica reale della bilancia e la curva caratteristica ideale.

M

Macrobilancia – Bilancia analitica per pesate comprese tra 100 e 200 g. I valori di divisione della scala di lettura sono inferiori a 10-5 della portata massima.

Massa – (m) E’ la quantità di materia che costituisce un corpo. Unità di misura è il kg campione.

Microbilancia – Bilancia analitica per pesate comprese tra 3 e 50 g. I valori di divisione della scala di lettura sono inferiori a 10-5 della portata massima.

Microgrammo – 10-9 kg.

Milligrammo – 10-6 kg

N

Navicella di pesata – Recipiente sagomato come una piccola nave, in vetro, porcellana o plastica, per contenere il campione da pesare.

O

OIML – Organisation International de Metrologie Legale.

Oz – Once

Ozt – Once troy – Unità di misura del settore orafo. Grammi 31,104.

P

Pesafiltro – Contenitore cilindrico in vetro o resina plastica, dotato di coperchio a tenuta d’aria, usato per contenere e trasferire il campione sul piattello della bilancia.

Peso certificato – Un peso che è usato per regolare la sensibilità di una bilancia.

Peso (forza peso) – E’ la forza con cui un corpo è attratto verso il centro della Terra ed è, in modulo, proporzionale alla quantità di materia che lo compone.

Peso commerciale – Peso di accuratezza limitata. Nel caso di 1 kg, il limite di tolleranza è di ± 0.4 g.

Peso netto – Il peso di un campione detratto dalla tara.

Picnometro – Recipiente in vetro di conosciuto esatto volume che serve per determinare la densità di un fluido o di piccole parti insolubili (ad esempio polveri).

Portata – E’ il carico massimo che può essere sopportato dalla bilancia senza che si verifichi alcuna interferenza con la normale capacità operativa dello strumento.

R

Resettaggio di stabilità – Operazione che consente di regolare la bilancia in funzione delle condizioni ambientali.

Riferibilità – Proprietà che la bilancia acquisisce quando viene sottoposta a taratura impiegando “campioni di lavoro” le cui masse sono state assegnate con riferimento a campioni riconosciuti come primari in un determinato contesto.

Ripetibilità – E’ il grado di concordanza tra i risultati di successive pesate dello stesso oggetto condotte nello stesso modo, dallo stesso operatore, con la stessa bilancia, nello stesso luogo, nelle stesse condizioni di utilizzazione, entro un breve periodo di tempo. Quantitativamente è la deviazione standard calcolata sui risultati di un certo numero di pesate eseguite nelle condizioni sopra riportate.

Riproducibilità – E’ il grado di concordanza tra i risultati di pesate successive dello stesso oggetto quando le singole misurazioni siano condotte cambiando operatore, bilancia, luogo, condizioni di utilizzazione, tempo.

Risoluzione – La più piccola variazione di massa capace di modificare in modo apprezzabile l’indicazione dello strumento. Nelle bilance con visualizzatore digitale rappresenta il valore di massa associato all’unità dell’ultima cifra.

S

Sistema di bloccaggio – Sistema per proteggere la bilancia quando non in uso.

Sensibilità – Rapporto tra il numero di divisioni di cui si sposta l’indice e la corrispondente variazione di carico (div/mg – div/g)

SI – Sistema Internazionale di Unità di Misura.

SIT – Servizio di Taratura in Italia.

S.N.T. – Servizio Nazionale di Taratura.

Stabilizzazione – Una bilancia è in equilibrio quando, dopo aver eseguito il carico del piatto di pesata, tutte le parti mobili che sono coinvolte nel processo di pesata hanno raggiunto una posizione di equilibrio stabile.

T

Tara elettrica – E’ il carico massimo che, elettricamente, può essere sottratto dal valore numerico indicato sul visualizzatore digitale.

Tara meccanica – E’ rappresentata dal carico massimo che può essere bilanciato usando masse sostitutive.

Taratura – Serie di operazioni che stabiliscono, sotto precise condizioni, la relazione tra i valori indicati dallo strumento ed i corrispondenti valori noti di masse campioni.

Temperatura di esercizio – Intervallo di temperatura in cui la bilancia fornisce risultati affidabili in accordo alle specifiche.

Termobilancia – Bilancia tecnica dotata di sistema di essiccazione per la determinazione diretta del contenuto di umidità del campione in esame.

Strumentazione analitica ed ausiliaria: I termometri

La “Buona Prassi di Laboratorio” e la normativa UNI EN 45001 richiedono che i termometri in uso nel laboratorio di analisi siano sottoposti ad un controllo periodico per accertarne l’ attendibilità.  E’ compito del Responsabile del laboratorio approntare una Procedura Operativa Standard nella quale viene indicato il protocollo da seguire per controllare tutti i termometri che sono presenti in laboratorio. Il controllo di questi termometri deve essere eseguito periodicamente a scadenze prefissate facendo riferimento ad un termometro certificato presso un Laboratorio Metrologico ufficiale del Sistema Nazionale di Taratura (SIT) ed in dotazione ad ogni singolo laboratorio di analisi.

Acquisizione termometro certificato SIT

Il termometro certificato SIT può essere acquistato presso International pbi di Milano, precisando il tipo di termometro ed il range di temperatura che si presume di utilizzare. Ciò è necessario per fissare i punti di taratura che il Laboratorio Metrologico ufficiale dovrà certificare.

E’ opportuno che il laboratorio di analisi si doti di almeno due termometri certificati in modo da avere range di temperatura differenziati, poter disporre di ricambio in caso di rottura ed avere disponibilità di un termometro nel periodo in cui l’altro è inviato per il controllo periodico al SIT.

 Procedura Operativa Standard

- OGGETTO

Controllo periodico attendibilità dei termometri in dotazione al laboratorio di analisi.

 - SCOPO

Accertare che tutti i termometri di impiego routinario coincidano con  le temperature di un termometro di riferimento certificato dal Laboratorio Metrologico del Sistema Nazionale di Taratura SIT (entro i limiti di tolleranza).

 - RESPONSABILE

Il Direttore di laboratorio con delega al capo tecnico di laboratorio.

 - MATERIALE

Termometro certificato SIT (scala da….°C a ….°C, divisione……, punti di taratura sulla scala…….°C,…….°C,…….°C).

Bagnomaria elettrico a circolazione forzata di acqua con precisione 1/10 di °C. 

(Per temperature superiori a 100°C si deve adottare un bagnomaria ad olio).

Supporto per flaconcini da 100 ml in policarbonato da introdurre in bagnomaria. Flaconcini a forma quadrata,  in policarbonato, con tappo a vite perforato, capacità 100 ml, con glicole etilenico.

Manuale di registrazione operazioni effettuate a scadenza periodica prefissata. –

CONSERVAZIONE TERMOMETRI CERTIFICATI

I termometri certificati devono essere conservati, a cura del capotecnico di laboratorio, nell’ astuccio protettivo, in luogo riparato dalla luce e da sbalzi di temperatura, con il bulbo non capovolto, non a portata di personale estraneo. I certificati originali devono essere conservati con la documentazione di base del laboratorio; fotocopia del certificato deve accompagnare ogni singolo termometro.

 - PROTOCOLLO

Portare la temperatura del bagnomaria al primo valore di taratura del termometro certificato che si vuole controllare, attendendo almeno 30 minuti per la stabilizzazione della temperatura. Inserire il termometro certificato attraverso il tappo a vite di un flaconcino in policarbonato, a forma quadrata, da 100 ml contenente  glicole etilenico e posizionato al centro del bagnomaria, nell’ apposito supporto. Inserire il termometro da controllare in un identico flaconcino e posizionarlo al centro del bagnomaria. Attendere 30 minuti ed eseguire la lettura della temperatura, raffrontando i valori dei due termometri. Lo scarto non deve essere superiore a ………. (questo valore lo si può conoscere dal certificato). In caso di non conformità, ripetere la prova accertandosi che il bagnomaria funzioni correttamente e che i flaconcini siano correttamente posizionati e pieni di liquido.

 I risultati della prova devono essere riportati nell’ apposito registro unitamente a data, nome e firma del tecnico che ha eseguito la prova e controfirmati dal Responsabile di laboratorio. Ripetere lo stesso protocollo per gli altri valori di temperatura relativi al termometro considerato.

Testo: Roberto Ligugnana

BPL – Il personale ed i locali di laboratorio

Il Personale

1. Tutte le persone coinvolte nell’attività di laboratorio, a partire dai Dirigenti sino ad arrivare agli addetti alle pulizie, devono possedere  una preparazione, addestramento, esperienza (e titolo di studio) che renda loro possibile la corretta esecuzione dei compiti loro assegnati.

2. Negli archivi del laboratorio devono essere riportati la “job description”, l’addestramento analitico seguito (seminari, corsi, etc.),  l’addestramento “BPL” ricevuto, l’esperienza acquisita da ogni singolo componente il laboratorio nell’ambito del proprio compito. Questa documentazione è molto utile quando si verifica un cambio di personale.

3. Il numero di persone deve essere sufficiente per l’esecuzione corretta e nei tempi dovuti di tutte le analisi che si intende eseguire come da protocollo.

4. In laboratorio deve essere disponibile il diagramma organizzativo con i compiti assegnati a ciascun operatore.

5. Il personale deve essere stato addestrato e deve operare con tutte le necessarie precauzioni di sicurezza per prevenire rischi chimici, biologici, radioattivi, meccanici, fisici.

6. Il personale deve essere stato addestrato ad indossare abiti e sistemi protettivi idonei alle operazioni che esegue (guanti, maschera, occhiali, camice, grembiule, schermo protettivo, etc.).

7. Qualsiasi persona che sia affetta da malattia od altro impedimento che potrebbe influenzare negativamente la qualità dei risultati deve essere esclusa dalla attività analitica.

 I locali

Il laboratorio deve essere di dimensioni tali e costruito in modo da facilitare la preparazione e conservazione dei campioni e le determinazioni analitiche. Ci dovranno essere opportune separazioni in modo da impedire che funzioni od attività abbiano effetti avversi sulla conduzione del laboratorio.

La parte chimico-fisica deve essere separata da quella biologica e le apposite strutture (cappe, isolatori, cabine biohazard, etc.) devono garantire l’isolamento di sostanze volatili, radioattive, infette, etc.  Idealmente un locale dovrà essere destinato al ricevimento dei campioni; un locale alla sala delle bilance; un locale “cucina” predisposto alla preparazione dei terreni per microbiologia. 

Non sempre un laboratorio dispone di tutti questi locali ed in tal caso il Responsabile dovrà preoccuparsi di approntare una piantina nella quale sono riportati e giustificati i posizionamenti di tutta la strumentazione analitica e non analitica ed un protocollo che indica la movimentazione interna e ne spiega le ragioni pratiche in modo logico.

Testo: Roberto Ligugnana

Applicazione della BPL al proprio laboratorio

L’applicazione della “corrente Buona Prassi di Laboratorio” è una esigenza non solo imposta da recenti direttive, ma anche “sentita” da molti di coloro che lavorano in laboratorio.   Il piacere e la soddisfazione di “lavorare bene” sono una aspirazione di tutti noi. Sovente il problema è costituito dalla limitata disponibilità di personale che dovrebbe essere coinvolto inizialmente nella messa a punto dei “protocolli” e nelle susseguenti procedure operative. 

Altra considerazione da farsi è che ogni laboratorio deve essere artefice della sua “Buona Prassi di Laboratorio” : deve essere il frutto della sua esperienza. Una intelligente soluzione è quella di adottare la tecnica del “passo dopo passo”, iniziando gradualmente secondo un programma prestabilito che porti a completare protocolli e procedure in un tempo prefissato di 18-24 mesi. Due ore alla settimana dovrebbero essere dedicate a questo scopo.

Il Direttore di laboratorio e tutto il personale hanno così il tempo sia di seguire la routine giornaliera che di dedicare tempo prezioso alla implementazione della “B.P.L.”.

 Perchè  la “B.P.L.”

Il “do it right the first time” degli anglosassoni  (fallo bene la prima volta) porta indubbi vantaggi:

 - si risparmia tempo

- si risparmia denaro

- si lavora con più soddisfazione

- i risultati sono affidabili a vantaggio di chi utilizzerà i risultati, dell’Operatore e del laboratorio

 I punti chiave della “c B.P.L.”

I punti di maggiore rilievo da considerare nell’implementare la “c B.P.L.” sono i seguenti:

 - il personale 

- i locali

- la strumentazione analitica ed ausiliaria

- i reagenti

- le procedure operative standard (SOP)

- la lettura, registrazione, archiviazione dei risultati

- il controllo ispettivo da parte di terzi

 L’introduzione della “c B.P.L.” nel proprio laboratorio

La “Buona prassi di Laboratorio” non è una attività statica, ma in continuo movimento al fine del miglioramento. Protocollo operativo, procedure analitiche, registrazione risultati, rapporto finale sono in continua evoluzione.

Qualità nel laboratorio di analisi: Quattro principi base

 1. Le misurazioni devono essere condotte seguendo metodi validi.

 2. Devono essere utilizzati Materiali di Riferimento Certificati  per assicurare la riferibilità delle misurazioni.

 3. I laboratori devono prevedere una verifica indipendente  delle loro prestazioni 

partecipando a programmi collaborativi di analisi  interlaboratorio nazionali ed internazionali.

 4. I laboratori devono ricercare l’approvazione indipendente  del loro Sistema di Qualità, 

preferibilmente mediante l’accreditamento.

Incubazione delle scatole Petri in termostato incubatore

Ogni incubatore dovrà essere corredato dalla seguente documentazione:

- documento di identificazione in accordo alle norme vigenti

- certificazione CE di sicurezza elettrica

- programma e protocollo di manutenzione ordinaria

- manuale di istruzioni in conformità alle direttive europee

•  Manutenzione ordinaria periodica dell’incubatore

Gli incubatori utilizzati per l’incubazione delle scatole Petri devono essere sottoposti a regolare controllo e manutenzione ordinaria periodica. Gli scarti minimi e massimi rispetto alla temperatura impostata dovranno essere compresi entro i limiti fissati dalla metodica seguita dal laboratorio.

•  Verifica e registrazione temperatura di incubazione

La soluzione ideale per un monitoraggio continuo della temperatura all’interno della camera di incubazione è rappresentata da un registratore elettronico tempo/temperatura. Non tutti i laboratori sono in grado di affrontare una tale spesa, ma si può ovviare in modo molto più semplice ed economico.

Un termometro a massima e minima è fissato allo sportello interno trasparente dell’incubatore in modo da poter identificare la posizione delle ancorette di massima e minima sulla scala termometrica senza alterare la temperatura della camera.

Nella Procedura Operativa Standard in cui è coinvolto l’incubatore si deve indicare che l’operatore, all’inizio della giornata deve accertare che la variazione di temperatura non sia stata superiore ai limiti fissati (ad es. ± 1° C). Il valore minimo e massimo viene registrato su modulo.

In caso di “non conformità” si devono indicare nella Procedura Operativa Standard le azioni da intraprendere (ad es.: trasferimento di scatole Petri e provette in altro idoneo incubatore, informazione alla Direzione sulla non conformità riscontrata, richiesta di intervento al Servizio di Assistenza Tecnica).

•  Accatastamento scatole Petri nell’incubatore

Le norme ISO precisano che le scatole Petri all’interno dell’incubatore non devono essere impilate più di 6 e devono trovarsi ad una distanza minima dalle pareti e tra pila e pila non inferiore a 2,5 cm.

Per questo scopo si utilizzano gli appositi cestelli con distanze standardizzate; questi cestelli evitano anche l’accidentale caduta delle scatole Petri durante la movimentazione all’interno del laboratorio, assicurando così l’applicazione della Buona Prassi di Laboratorio in termini di sicurezza biologica per il personale.

• Viene qui di seguito suggerito uno schema di controllo.

Controllo settimanale

Accertamento semplice rispondenza temperatura con termometro certificato

Controllo mensile

Disinfezione pareti interne

Accertamento rispondenza temperatura con termometro a minima/massima

Controllo semestrale

Accertamento rispondenza temperatura con termometro registratore

Testo: Roberto Ligugnana

Liquidi di congelamento per differenti temperature