La micropipetta a cuscinetto d’aria può essere impiegata in quattro differenti modi:

- pipettaggio diretto

- pipettaggio inverso

- pipettaggio ripetitivo

- risospensione

La POS riportata ha lo scopo di chiarire a tutti componenti di laboratorio come e quando scegliere il metodo di pipettaggio più appropriato.

PROCEDURA OPERATIVA STANDARD

- Oggetto

Scelta e corretto impiego del metodo di pipettaggio con micropipette

- Obiettivo

Corretto utilizzo delle micropipette da parte di tutti i componenti il laboratorio

- Terminologia

Aspirazione, Ergonomia, Erogazione, Espulsore, microlitro, Pipettaggio diretto, pipettaggio inverso, Pipettaggio ripetitivo, Risospensione, Puntale Puntale con filtro

- Responsabilità

Capo laboratorio

- Materiale

Micropipette, puntali, Puntali con filtro.

Pipettaggio diretto

E ‘il modo più comune di impiego di una micropipetta.

Adatto per la maggior parte dei reagenti liquidi.

Il volume aspirato corrisponde al volume erogato.

Con la seconda pressione sul pulsante di comando, tutto il liquido viene espulso dal puntale.

1. Dopo aver adattato perfettamente il puntale alla micropipetta, premere il pulsante di comando: il pistone elimina parte del volume morto. 2. Immergere il puntale nel liquido da prelevare. Rilasciando la pressione sul pulsante di comando, il liquido viene aspirato.

3.Sollevare il puntale dal liquido facendolo scorrere lungo la parete del recipiente ed appoggiare la punta del puntale contro la parete del recipiente ricevente.

4. Premere il pulsante di comando sino al primo fermo; continuare la pressione sino al secondo fermo per far defluire i residui di liquido rimasto.

5. Premere l’espulsore per allontanare il puntale dalla micropipetta.

Pipettaggio inverso

Sistema di pipettaggio particolare adatto per liquidi leggermente viscosi o che tendono a produrre schiuma. Il volume di liquido aspirato è più grande di quello necessario. Si migliora la precisione su piccoli volumi di campione o nel pipettaggio ripetitivo.

1. Dopo aver adattato perfettamente il puntale alla micropipetta, premere il pulsante sino al secondo fermo.

2. Immergere il puntale nel liquido.

3. Rilasciare la pressione sul pulsante: il liquido viene aspirato.

4. Sollevare il puntale dal liquido facendolo scorrere lungo la parete del recipiente ed adagiarlo sulla parete del recipiente ricevente.

5. Premere il pulsante di comando sino al primo fermo:il volume programmato sarà erogato.

6. Rimuovere la micropipetta dal recipiente ricevente e premere il pulsante sino al secondo fermo per espellere il liquido residuo.

7. Premere l’espulsore per allontanare il puntale dalla micropipetta.

Pipettaggio ripetitivo

Tecnica che si basa sul pipettaggio inverso. Si adatta per test routinari e per pipettaggi in serie per ridurre ai fini ergonomici il movimento del pollice.

1. Dopo aver adattato perfettamente il puntale alla micropipetta, premere il pulsante sino al secondo fermo. Immergere il puntale nel liquido.

2. Rilasciare la pressione sul pulsante: il liquido sarà aspirato.

3. Sequenze di aspirazioni ed erogazioni mantenendo il liquido del secondo fermo come riserva

4. Rimuovere la micropipetta dal recipiente di ricevimento e premere il pulsante sino al secondo fermo per eliminare il liquido residuo

5. Premere l’espulsore per allontanare il puntale dalla micropipetta.

Risospensione

Operazione molto importante nella fase analitica di preparazione. Il mescolamento si ottiene con ripetute aspirazioni ed erogazioni, mantenendo il puntale sempre immerso nel liquido. Adottare un movimento lento del pistone per evitare la formazione di schiuma o l’entrata di gocce nella micropipetta.

Nota Applicativa Procedure Operative Standard N.6 – Precauzioni per riduzione rischio di infezioni in ospedale

Le “Precauzioni Universali” possono prevenire la trasmissione dei patogeni veicolati dal sangue o da altri liquidi biologici solo a patto che l’operatore sanitario o di laboratorio di microbiologia si adegui alle direttive impartite in uno specifico documento scritto, adottato anche per la formazione e ala Procedura Operativa Standard (POS). L’applicazione delle norme da parte degli operatori sarà

maggiore se essi comprenderanno le nozioni e le ragioni alla base delle “Precauzioni Universali”, oltresapere che verranno tenuti sotto controllo.

Procedura Operativa Standard

- IDENTIFICAZIONE

Numero di Protocollo……….. Nome Responsabile……………… Nome compilatore…………

Data di emissione…………… Numero di Pagina…………………

Data di Revisione…………… Numero totale di pagine………….

- OGGETTO

Precauzioni universali da applicare nella manipolazione di liquidi biologici per la protezione degli operatori sanitari e laboratorio biologico dal rischio di infezione.

- OBIETTIVO

Riduzione delle infezioni negli ambienti nosocomiali e nel laboratorio di microbiologia evitando all’operatore una esposizione parenterale, mucosa o della cute non integra ai patogeni veicolati dal sangue o da altri liquidi infetti.

- RESPONSABILITA’

Responsabile della Sicurezza in ambito nosocomiale o laboratoristico.

- TERMINOLOGIA

Buona Prassi Igienica, D.P.I., Dispositivo di Protezione Individuale, Patogeno, Potenzialmente patogeno, Precauzioni Universali, Rischio Biologico, Rischio di infezione, TNT, Tessuto Non Tessuto.

- MATERIALE

PROTEZIONE CUTE Crema ammorbidente per mani

PROTEZIONE MANI Guanti ,Sottoguanti

GREMBIULI Grembiule impermeabile

CAMICI Camice monouso

PROTEZIONE CORPO Tuta monouso

PROTEZIONE VISTA E MUCOSE Occhiali , Schermo

PROTEZIONE VIE RESPIRATORIE E MUCOSE

Visiera protettiva , Maschera facciale monouso

RACCOLTA RESIDUI BIOLOGICI Contenitori di sicurezza, Contenitori di sicurezza per rifiuti clinici

RACCOLTA RESIDUI  CITOTOSSICI

Contenitori di sicurezza per rifiuti citotossici

RACCOLTA RIFIUTI A RISCHIO INFETTIVO

Sacchetti 45 litri con coperchio a tenuta ermetica e maniglia

PULIZIA SUPERFICI Kit di pronto intervento per bonifica di accidentali perdite di liquidi biologici

TRASPORTO CAMPIONI DAI REPARTI AL LABORATORIO

Sacchetti , Cestello, Etichette autoadesive

ADDESTRAMENTO Dischetto “Il rischio biologico in ospedale – Le infezioni professionali”,

Manuale “La sicurezza nei reparti ospedalieri”

-PROTOCOLLO

L’espressione “Precauzioni Universali” indica un sistema di controllo fondato sul presupposto che il sangue ed i liquidi biologici costituiscono una potenziale fonte di patogeni.

Oltre al sangue, i liquidi riconosciuti come direttamente legati alla trasmissione di patogeni veicolati dal sangue sono il liquido seminale, le secrezioni vaginali, il liquido cerebro-spinale, il liquido sinoviale, il liquido pleurico, il liquido peritoneale, il liquido pericardico, il liquido amniotico, il latte materno, la saliva in ambiente odontoiatrico e tutti i terreni nutritivi inseminati in laboratorio.

- LINEE GUIDA

MANI –  Lavarsi le mani prima e dopo aver prestato assistenza a ciascun paziente. Sapone, frizione e acqua corrente sono le caratteristiche ideali di un efficace lavaggio. Il sangue od i liquidi corporei che contaminano la cute non protetta dell’operatore dovrebbero essere eliminati immediatamente con il lavaggio.

Il lavaggio delle mani è indispensabile ogniqualvolta si tolgono i guanti od altri D.P.I. ed al momento di lasciare un’area di lavoro in cui si sia verificato un contatto con il sangue o con un altro materiale potenzialmente infetto.

GUANTI – Obbligo di utilizzare i guanti ogniqualvolta si eseguano interventi con accesso vascolare e quando si maneggino o si tocchino superfici od oggetti contaminati.

La scelta del guanto è in funzione del compito che deve essere svolto. Si raccomanda l’uso di guanti sterili per gli interventi che comportano un contatto con le aree del corpo sterili. Si devono adottare guanti da esplorazione per quegli interventi che comportano un contatto con le mucose e per tutti gli altri procedimenti che non richiedono l’uso di guanti sterili. Poiché i guanti chirurgici o da esplorazione non possono essere lavati o sterilizzati, non devono essere riutilizzati.

GREMBIULI – Devono essere indossati durante gli interventi o le attività che possono causare spruzzi o schizzi di sangue o di altri liquidi biologici, per proteggere gli indumenti di lavoro degli operatori. Dovrebbero essere possibilmente impermeabili.

CAMICI – Dovrebbero essere in “tessuto non tessuto” che impedisce il passaggio del sangue o dei liquidi biologici sugli indumenti dell’operatore e viceversa.

MASCHERINE E  OCCHIALI PROTETTIVI

Devono essere utilizzati per proteggere le mucose dell’operatore nel corso di attività che possa produrre schizzi di sangue o di altri liquidi biologici.

Gli occhiali protettivi devono essere indossati permanentemente in laboratorio.

AGHI E OGGETTI  ACUMINATI

E’ vietato ricorrere alla tecnica a due mani per re-incapucciare gli aghi montati sulle siringhe.

Gli oggetti acuminati, gli aghi e le siringhe già usate devono essere gettati in blocco, senza re-incapucciare l’ago, in apposito contenitore resistente alla puntura ed a prova di compressione situato nel punto di utilizzo.

RIFIUTI INFETTIVI Utilizzare sacchi a perfetta tenuta ermetica e con le diciture richieste dalle disposizioni legislative vigenti.

CAMPIONI DI LABORATORIO

I campioni devono essere contenuti in un doppio contenitore conforme alle disposizioni del Ministero della Sanità. Tutti i campioni sono da considerarsi potenzialmente a rischio di infezione, indipendentemente dalla loro provenienza.

Utilizzare le apposite etichette con i segnali di rischio biologico.

SUPERFICI Pulire abitualmente le superfici per rimuovere fisicamente i microrganismi e la sporcizia.

Utilizzare soluzioni disinfettanti-detergenti preparate in base alle istruzioni del produttore per quel determinato impiego. In caso di spargimenti, adottare gli appositi kit per il recupero del prodotto e la decontaminazione della superficie.

ADDESTRAMENTO Prevedere incontri periodici con gli operatori, utilizzando l’apposito materiale didattico.

‰ Riferimenti

Susan Sebazco – Le Precauzioni Universali – Sala Operatoria – Anno XXIV – Luglio 1996 – pg 13/15. 

Procedura Operativa Standard: Termometri certificati

- OGGETTO

Controllo periodico attendibilità dei termometri in dotazione al laboratorio di analisi.

 - SCOPO

Accertare che tutti i termometri di impiego routinario coincidano con  le temperature di un termometro di riferimento certificato dal Laboratorio Metrologico del Sistema Nazionale di Taratura SIT (entro i limiti di tolleranza).

 - RESPONSABILE

Il Direttore di laboratorio con delega al capo tecnico di laboratorio.

 - MATERIALE

Termometro certificato SIT (scala da….°C a ….°C, divisione……, punti di taratura sulla scala…….°C,…….°C,…….°C).

Bagnomaria elettrico a circolazione forzata di acqua con precisione 1/10 di °C. 

(Per temperature superiori a 100°C si deve adottare un bagnomaria ad olio).

Supporto per flaconcini da 100 ml in policarbonato da introdurre in bagnomaria. Flaconcini a forma quadrata,  in policarbonato, con tappo a vite perforato, capacità 100 ml, con glicole etilenico.

Manuale di registrazione operazioni effettuate a scadenza periodica prefissata. –

CONSERVAZIONE TERMOMETRI CERTIFICATI

I termometri certificati devono essere conservati, a cura del capotecnico di laboratorio, nell’ astuccio protettivo, in luogo riparato dalla luce e da sbalzi di temperatura, con il bulbo non capovolto, non a portata di personale estraneo. I certificati originali devono essere conservati con la documentazione di base del laboratorio; fotocopia del certificato deve accompagnare ogni singolo termometro.

 - PROTOCOLLO

Portare la temperatura del bagnomaria al primo valore di taratura del termometro certificato che si vuole controllare, attendendo almeno 30 minuti per la stabilizzazione della temperatura. Inserire il termometro certificato attraverso il tappo a vite di un flaconcino in policarbonato, a forma quadrata, da 100 ml contenente  glicole etilenico e posizionato al centro del bagnomaria, nell’ apposito supporto. Inserire il termometro da controllare in un identico flaconcino e posizionarlo al centro del bagnomaria. Attendere 30 minuti ed eseguire la lettura della temperatura, raffrontando i valori dei due termometri. Lo scarto non deve essere superiore a ………. (questo valore lo si può conoscere dal certificato). In caso di non conformità, ripetere la prova accertandosi che il bagnomaria funzioni correttamente e che i flaconcini siano correttamente posizionati e pieni di liquido.

 I risultati della prova devono essere riportati nell’ apposito registro unitamente a data, nome e firma del tecnico che ha eseguito la prova e controfirmati dal Responsabile di laboratorio. Ripetere lo stesso protocollo per gli altri valori di temperatura relativi al termometro considerato.

Testo: Roberto Ligugnana

Procedura Operativa Standard per la Buona Prassi Igienica in Ospedale

Le “Precauzioni Universali” possono prevenire la trasmissione dei patogeni veicolati dal sangue o da altri liquidi biologici solo a patto che l’operatore sanitario o di laboratorio di microbiologia si adegui alle direttive impartite in uno specifico documento scritto, adottato anche per la formazione: la Procedura Operativa Standard (POS). 

 Procedura Operativa Standard

- IDENTIFICAZIONE

- Numero di Protocollo ……………  

- Nome Responsabile ……………

- Nome compilatore ……………

- Data di emissione ……………  

- Numero di Pagina ……………

- Data di Revisione ……………

- Numero totale di pagine ……………

 - OGGETTO

Precauzioni universali da applicare nella manipolazione di liquidi biologici per la protezione degli operatori sanitari e laboratorio biologico dal rischio di infezione.

 - OBIETTIVO

Riduzione delle infezioni negli ambienti nosocomiali e nel laboratorio di microbiologia evitando all’operatore una esposizione parenterale, mucosa o della cute non integra ai patogeni veicolati dal sangue o da altri liquidi infetti.

 - RESPONSABILITA’

Responsabile della Sicurezza in ambito nosocomiale o laboratoristico.

 - TERMINOLOGIA

Buona Prassi Igienica, D.P.I., Dispositivo di Protezione Individuale, Maschera, Patogeno, Potenzialmente patogeno, Precauzioni Universali, Rifiuto citotossico, Rifiuto Clinico, Rifiuto Infettivo, Rischio Biologico, Rischio di infezione, TNT, Tessuto Non Tessuto.

 -MATERIALE

PROTEZIONE CUTE  Crema ammorbidente per mani

PROTEZIONE MANI  Guanti , Sottoguanti

GREMBIULI  Grembiule impermeabile  

CAMICI  Camice monouso

PROTEZIONE CORPO  Tuta monouso

PROTEZIONE VISTA E MUCOSE       Occhiali protettivi , Schermo protettivo da tavolo

PROTEZIONE VIE RESPIRATORIE E MUCOSE

Visiera protettiva , Maschera facciale monouso , Maschera facciale  

RACCOLTA RESIDUI BIOLOGICI    Contenitori di sicurezza per placenta, Contenitori di sicurezza per rifiuti clinici

RACCOLTA RESIDUI  CITOTOSSICI

Contenitori di sicurezza per rifiuti citotossici

RACCOLTA  RIFIUTI A RISCHIO INFETTIVO

Sacchetti 45 litri con coperchio a tenuta ermetica e maniglia 

PULIZIA SUPERFICI  Kit di pronto intervento per bonifica di accidentali perdite di liquidi biologici, Polvere assorbente per liquidi biologici, fazzoletti disinfettanti

TRASPORTO CAMPIONI DAI REPARTI AL LABORATORIO

Sacchetti, Cestello , Etichette autoadesive.

 -PROTOCOLLO

Linee guida

 MANI  Lavarsi le mani prima e dopo aver prestato assistenza a ciascun paziente. Sapone, frizione e acqua corrente sono le caratteristiche ideali di un efficace lavaggio. Il sangue od i liquidi corporei che contaminano la cute non protetta dell’operatore dovrebbero essere eliminati immediatamente con il lavaggio.

Il lavaggio delle mani è indispensabile ogniqualvolta si tolgono i guanti od altri D.P.I. ed al momento di lasciare un’area di lavoro in cui si sia verificato un contatto con il sangue o con un altro materiale potenzialmente infetto.

GUANTI  Obbligo di utilizzare i guanti ogniqualvolta si eseguano interventi con accesso vascolare e quando si maneggino o si tocchino superfici od oggetti contaminati.

La scelta del guanto è in funzione del compito che deve essere svolto. Si raccomanda l’uso di guanti sterili per gli interventi che comportano un contatto con le aree del corpo sterili.  Si devono adottare guanti da esplorazione per quegli interventi che comportano un contatto con le mucose  e per tutti gli altri procedimenti che non richiedono l’uso di guanti sterili. Poiché i guanti chirurgici o da esplorazione non possono essere lavati o sterilizzati, non devono essere riutilizzati.

GREMBIULI  Devono essere indossati durante gli interventi o le attività che possono causare spruzzi o schizzi di sangue o di altri liquidi biologici, per proteggere gli indumenti di lavoro degli operatori. Dovrebbero essere possibilmente impermeabili.

CAMICI  Dovrebbero essere in “tessuto non tessuto” che impedisce il passaggio del sangue o dei liquidi biologici sugli indumenti dell’operatore e viceversa.

MASCHERINE E  OCCHIALI PROTETTIVI

Devono essere utilizzati per proteggere le mucose dell’operatore nel corso di attività che possa produrre schizzi di sangue o di altri liquidi biologici.

Gli occhiali protettivi devono essere indossati permanentemente in laboratorio.

AGHI E OGGETTI  ACUMINATI

E’ vietato ricorrere alla tecnica a due mani per re-incapucciare  gli aghi montati sulle siringhe.

Gli oggetti acuminati, gli aghi e le siringhe già usate devono essere gettati in blocco, senza re-incapucciare l’ago, in apposito contenitore resistente alla puntura ed a prova di compressione situato nel punto di utilizzo.

RIFIUTI INFETTIVI  Utilizzare sacchi a perfetta tenuta ermetica e con le diciture richieste dalle disposizioni legislative vigenti.

CAMPIONI DI LABORATORIO

I campioni devono essere contenuti in un doppio contenitore conforme alle disposizioni del Ministero della Sanità. Tutti i campioni sono da considerarsi potenzialmente a rischio di infezione, indipendentemente dalla loro provenienza.

Utilizzare le apposite etichette con i segnali di rischio biologico.

SUPERFICI  Pulire abitualmente le superfici per rimuovere fisicamente i microrganismi e la sporcizia.

Utilizzare soluzioni disinfettanti-detergenti preparate in base alle istruzioni del produttore per quel determinato impiego. In caso di spargimenti, adottare gli appositi kit per il recupero del prodotto e la decontaminazione della superficie. 

ADDESTRAMENTO  Prevedere incontri periodici con gli operatori, utilizzando l’apposito materiale didattico.

Fonte: Susan Sebazco – Le Precauzioni Universali – Sala Operatoria – Anno XXIV – Luglio 1996 – pg 13/15

Manipolazione liquidi criogenici

PROCEDURA OPERATIVA STANDARD

- Oggetto

Protezione del personale addetto alla manipolazione di liquidi criogenici nel laboratorio di analisi

- Obiettivo

Ridurre i rischi da manipolazione di liquidi criogenici

- Terminologia

Azoto liquido, Criobiologia, Criogenia, DMSO, D.P.I., Dispositivi di Protezione Individuale, Ghiaccio

secco, Glicerolo, Ustione, Vial

- Responsabilità

Responsabile della Sicurezza in laboratorio

- Materiale

Guanti per criogenia, Scatola per provette , Provetta per criogenia, Kit antiustioni, Visiera protettiva, Grembiule per criogenia

- Protocollo

- Avvertenze generali

a. Operare in ambienti ben ventilati

b. Indossare sempre i Dispositivi di Protezione Individuale  (guanti, schermo facciale, grembiule)

c. Non indossare pantaloni con risvolto

d. Non riempire mai all’eccesso recipienti per azoto liquido in posizione verticale

e. Non chiudere mai ermeticamente contenitori per azoto liquido

f. Fare molta attenzione al travaso di azoto liquido

g. Togliersi immediatamente gli abiti in caso di versamento sugli stessi di azoto liquido

h. Leggere con cure le misure preventive per il travaso di azoto liquido

i. Non riparare contenitori prima di averli svuotati da azoto liquido

j. Mantenere in buone condizioni la stazione di Pronto Soccorso per bruciature

k. Recarsi immediatamente al Pronto Soccorso in caso di ustioni.   – Cura dei Guanti

l. Non immergere mai i guanti in azoto liquido

m. Utilizzare sempre guanti di corretta taglia

n. Non utilizzare i guanti alla fiamma diretta

o. Non lavare i guanti criogenici in lavatrice. Conservarli in un ambiente asciutto

p. Utilizzare sempre i guanti in combinazione con il grembiule criogenico

- Caricamento / Svuotamento contenitori criogenici

Opportune precauzioni devono essere prese quando si prelevano campioni  dall’interno dei contenitori  criogenici. Indossare sempre i D.P.I. Non attenersi a questi suggerimenti può determinare gravi ferite.

- Ispezione contenitori criogenici

Controllare sistematicamente con cura  i contenitori all’atto della installazione per accertare l’assenza  di incrinature o danneggiamenti. E’ consigliabile di caricare il contenitore con azoto liquido e verificare  a distanza di 24 – 48 – 72 ore le sue condizioni.

- Ustioni

Il contatto della pelle con i liquidi criogenici provoca ustioni.  Durante il travaso proteggere sempre  occhi e pelle.  Per la protezione delle braccia adottare guanti lunghi coibentati, di facile rimozione. I pantaloni devono rimanere al di fuori delle calzature in modo da proteggersi da eventuali fuoriuscite  di  liquidi. Utilizzare sempre  la visiera protettiva.

- Manipolazione delle fiale criogeniche

Le fiale possono “esplodere” nel momento del loro prelevamento dall’azoto liquido. Nell’estrarre una fiala da un sistema di conservazione a bassa temperatura attenersi a precise precauzioni.  Indossare camice, schermo facciale, guanti coibentati. Fare attenzione al rischio biologico a seguito di possibile  fuoriuscita di materiale biologico contaminato o contaminante.

- Contaminazione sistema di congelamento

In caso di contaminazione sospetta del contenitore per fuoriuscita di liquido potenzialmente infetto, procedere alla decontaminazione dopo aver riportato il recipiente a temperatura ambiente.

Procedura Operativa Standard per il trasferimento del campione

- OGGETTO

Trasferimento del campione deperibile al laboratorio

- OBIETTIVO

Trasferimento del campione al laboratorio senza che il campione modifichi le sue caratteristiche microbiologiche

- RESPONSABILITA’

Segreteria ricevimento campioni

- MEZZI

Frigorifero portatile elettrico, termometro portatile, fazzolettini disinfettanti, sacchetti “Presto Chiuso”, documenti per la identificazione del

campione, accessori per la marcatura, sigillatura, confezionamento del campione

- PROTOCOLLO

1. Il frigorifero portatile elettrico, al momento del prelievo, deve già trovarsi alla corretta temperatura di trasporto indicata dalle disposizioni di legge o dalle necessità microbiologiche. L’operatore deve portare il frigorifero alla temperatura di esercizio prima di collegarlo alla batteria della sua automobile; ciò richiederà alcune ore.

Le norme ISO precisano le seguenti direttive alle quali attenersi:

Prodotti stabili – Temperatura ambiente

Prodotti freschi e refrigerati - Tra 0 e +4 ° C

Prodotti surgelati - Al di sotto di – 18 ° C

Prodotti pastorizzati - Tra 0 e + 4 ° C

Unità deteriorate - Tra 0 e + 4 ° C

2. Dotarsi di sacchetti in plastica sterili a tenuta ermetica,di capacità differenti, per la raccolta di campioni senza  confezione o per il loro raffreddamento sotto acqua corrente.

3. In previsione di campioni singoli voluminosi, aggiungere piastre eutectiche al frigorifero per accelerare il raffreddamento della massa.

4. Il frigorifero portatile deve essere lavato e disinfettato dopo ogni prelievo.

5. Registrare la temperatura interna di un campione “prova” adiacente al campione  “originale” all’inizio del trasferimento. Sullo stesso campione “prova” non utilizzato per l’analisi si controlla la temperatura al momento dell’arrivo in laboratorio.

6.  Registrare la temperatura del frigorifero portatile al momento dell’inizio del trasferimento del campione.

7. Grosse masse di campione prelevate calde (ad esempio all’ uscita del pastorizzatore) devono essere raffreddate, opportunamente protette per evitare che si inquinino od assorbano acqua,  sotto acqua corrente fredda o gelata prima della loro introduzione nel frigorifero portatile. Isolare eventualmente il campione in un sacchetto di plastica durante questa operazione. Verificare la corretta temperatura con il termometro portatile.

8. Mantenere a portata di mano ed opportunamente protetti tutti i documenti ufficiali e non ufficiali legati al previsto campionamento.

Trasferimento del campione

Organizzare il trasferimento in modo che il campione giunga al laboratorio nel tempo più breve, con la garanzia che non si interrompa la catena del freddo. Posizionare il frigorifero portatile lontano dalla luce solare diretta e  con le griglie di ventilazione libere.  Quando possibile, avvisare telefonicamente o via fax il laboratorio dell’imminente arrivo dei campioni, precisando tutti i dati relativi alla spedizione.  Accertare che non ci siano “ponti vacanzieri” o festività locali che allungherebbero i tempi di trasporto. Una volta raggiunto il laboratorio, il campione non deve essere abbandonato a se stesso, ma lasciato a mani di un responsabile dal quale si deve pretendere una firma di conferma di ricevimento del campione in condizioni idonee ad essere analizzato.

Compilazione di una Procedura Operativa Standard (POS)

Alla base della attività di un laboratorio che segue o ha in programma di seguire la corrente Buona   Prassi di Laboratorio ci sono le “Procedure Operative Standard” (POS in breve).   Le “POS” sono in genere anche il punto più “bombardato” dagli ispettori degli enti incaricati di accertare il corretto adeguamento del laboratorio alla cBPL (Sinal, FDA, I.S.S-M.S., etc): se esistono, se sono applicate, come sono scritte, etc.   I suggerimenti qui di seguito riportati vogliono essere solo una “linea guida” di buon senso per chi non ha mai scritto una POS od un “rinfrescamento” per chi lo fa già.

Flessibilità

Per scrivere correttamente una POS ci si deve attenere a due regole d’oro:

- dettagli chiari, precisi, concisi, comprensibili a chiunque

- elasticità di procedure per non perdere in efficienza

Un esempio può essere dato da una POS in cui è scritto che 400 mg di campione devono essere  trasferiti in un matraccio tarato a 200 ml e diluito a volume. Se si dispone solo di 300 mg di campione, riducendo il liquido di dissoluzione, si infrange la POS? Dal punto di vista analitico no, ma dal punto di vista “burocratico”, un ispettore potrebbe non essere d’accordo. Sarebbe pertanto opportuno, nell’esempio riportato, fare riferimento al quantitativo di campione in mg per ml.

I punti base di una POS

La struttura di base di una POS deve prevedere:

1. Identificazione del documento

2. Oggetto

3. Scopo

4. Responsabilità

5. Protocollo

6. Frequenza

7. Aggiornamento

1. Identificazione del documento

La prima pagina della POS deve riportare il nome dell’autore/autori; la firma di chi ha approvato la POS; data; numero di pagine complessive e numero di revisione. Ogni pagina successiva deve riportare titolo, numero di pagina e di revisione.

2. Oggetto 

Questo paragrafo indica con un chiaro titolo l’argomento trattato. Ad esempio la decontaminazione ed il lavaggio della vetreria destinata alla  determinazione dei metalli in tracce.

3. Scopo

Questo paragrafo indica le ragioni per le quali la POS è applicata e quando la si deve applicare. Ad esempio per evitare che, nella determinazione dei metalli in tracce, tracce di residui possano alterare i risultati.

4. Responsabilità

Questo paragrafo indica la persona od il dipartimento / settore che è responsabile della implementazione di  questa POS. Ad esempio il laboratorio C.Q. od il direttore del laboratorio di analisi chimiche.

5. Protocollo

Questo paragrafo indica “come si deve fare” e dovrebbe essere scritto come indicato in precedenza con le due regole d’oro.

6. Frequenza

Questo paragrafo indica l’intervallo al quale la specifica POS deve essere applicata. Ad esempio se la taratura di una strumentazione deve essere eseguita in occasione di ogni determinazione analitica o periodicamente.

7. Aggiornamento 

Questo paragrafo deve indicare tutti gli aggiornamenti alla POS, le ragioni di tali aggiornamenti, le date degli aggiornamenti, chi ha approvato gli aggiornamenti. ‰ Lunghezza di una POS  - Non esiste una regola: alcuni entrano nei minimi dettagli, altri preferiscono essere più generici.  Considerato che le POS di un laboratorio facilmente superano il centinaio, è opportuno non esagerare nella lunghezza, ma in ogni caso essere sempre precisi, senza lasciare molto alla fantasia di chi legge la POS. Anche in questo caso il buon senso deve essere di guida.

Formato di una POS

Si può adottare lo stile “aperto” con titoli seguiti da paragrafi oppure lo stile “militare” con numerazione progressiva e sotto-numerazione.  Lo stile “militare” ha il vantaggio che la numerazione rende più immediato il riferimento.

Versioni autorizzate

Solo le versioni autorizzate ed aggiornate/revisionate devono circolare in laboratorio e devono essere affidate ad una persona che le renda disponibili agli interessati. Le versioni obsolete delle POS devono essere restituite, archiviate e rintracciabili per ricerche storiche. E’ indispensabile che esista una registrazione dei documenti aggiornati e che si abbia traccia dei documenti obsoleti con la firma della restituzione alla persona responsabile dell’archiviazione.

Conclusioni

E’ chiaro, ma potrebbe non essere ovvio, che quanto scritto in una POS ed approvato deve essere rigorosamente seguito.  Quanto si scrive deve pertanto essere fattibile e la POS che si è scritta fa riferimento al proprio laboratorio e non a quello di altri! Gli ispettori che devono controllare l’applicazione della corretta cBPL non sono tanto interessati allo stile ed alla lunghezza di una POS, quanto alla loro esistenza per ogni operazione che si esegue in laboratorio ed alla loro reale consistente applicazione.