Glossario di Criogenia

A

Additivo crioprotettivo – Sostanza, prodotto chimico che protegge la cellula durante la fase di congelamento, minimizzando gli effetti negativi dell’aumento della concentrazione di soluto e della formazione dei cristalli di ghiaccio.
Agente crioprotettivo – Vedi additivo crioprotettivo.
Allarme livello azoto liquido – Sistema automatico per allertare l’operatore che l’azoto liquido del congelatore deve essere rabboccato.
ATCC – American Type Culture Collection (Ente USA).
Azoto liquido – Gas criogenico di conservazione che allo stato liquido ha una temperatura di -196 °C.

 

C

Calore latente di fusione – Il cambio di stato da liquido a cristallino determina produzione di energia in forma di calore e ciò può essere negativo per la vitalità delle cellule.
Canna – (Cane in inglese) Termine per indicare un dispositivo di aggancio in alluminio che trattiene vial sovrapposte quando sono introdotte in azoto liquido per sfruttare al meglio lo spazio disponibile.
Caratterizzazione cellulare – Accertamento delle caratteristiche specifiche di una linea cellulare prima o dopo il trattamento criogenico.
Centrifugazione – Trattamento delle cellule per concentrazione delle stesse prima della fase di congelamento per raggiungere una migliore resistenza allo stress e nella fase di scongelamento per rimuovere il surnatante e diluire il crioprotettivo.
Concentrazione – Trattamento delle cellule eseguito prima del congelamento per assicurare una migliore resistenza allo stress.
Congelatori meccanici – Mantengono le temperature criogeniche mediante compressori.
Congelatori ad azoto liquido – Mantengono le temperature criogeniche mediante l’immersione dei campioni nella fase liquida o gassosa dell’azoto.
Criobiologia – Lo studio della vita a temperature criogeniche.
Crioconservazione – Trattamento e mantenimento di una popolazione di cellule a temperature criogeniche per assicurare la loro conservazione nel tempo.

 

D

DMSO – Crioprotettivo dimetilsulfossido impiegato in concentrazione del 5-10%.

 

E

Equilibratura – Il periodo di tempo che intercorre tra l’aggiunta del crioprotettivo alla sospensione cellulare e l’inizio del processo di raffreddamento è definito periodo di equilibratura. In genere è compreso tra 15 e 45/60 minuti.
Esplosione – Le fiale in vetro possono esplodere quando esposte ad azoto liquido. Gli operatori devono pertanto indossare maschera protettiva, guanti e grembiuli criogenici per la propria sicurezza.

 

G

Glicerolo – Crioprotettivo.

 

I

Inventario – Sistema manuale od elettronico per conservare la registrazione di tutto il materiale crioconservato.

 

L

Locator – Contenitore riempito di azoto liquido per la conservazione di cellule.
Lotto di mantenimento – Partendo da una coltura iniziale di una determinata popolazione microbica da congelare, è consigliato di approntare alcune vial per il lotto di mantenimento e diverse vial dei lotti di lavoro. Nella routine si usano le vial dei lotti di lavoro, mentre le vial del lotto di mantenimento sono mantenute di riserva. In questo modo si limitano le possibilità della contaminazione crociata.
Lotto di lavoro – Lotto di vial utilizzate per la routine.

 

P

Permeabilità cellulare – La permeabilità cellulare influisce sulla velocità di perdita di acqua durante il processo di congelamento: una cellula a maggiore permeabilità sopporta meglio un rapido raffreddamento.
Popolazione cellulare – Numero di cellule vitali stimate prima del trattamento di congelamento e dopo il trattamento di scongelamento.
Punto di Congelamento – Temperatura alla quale una soluzione passa dallo stato liquido allo stato solido.

 

R

Raffreddamento lento – Un raffreddamento lento durante il processo di congelamento determina una maggior perdita di acqua dalla cellula , con meno cristalli intracellulari, ma con aumento degli effetti negativi della concentrazione del soluto.
Raffreddamento rapido – Un raffreddamento rapido durante il processo di congelamento minimizza gli effetti della concentrazione del soluto in quanto i cristalli di ghiaccio si formano uniformemente, ma determina la presenza di maggior ghiaccio intracellulare.
Raffreddamento incontrollato – Le vial con la coltura allo stato liquido sono introdotte direttamente in congelatore.
Raffreddamento semi-controllato – Le vial con la coltura allo stato liquido sono introdotte dapprima in un contenitore di raffreddaamento intermedio prima di passare al congelamento definitivo.
Raffreddamento controllato – Le vial con la coltura allo stato liquido sono introdotte in congelatore a raffreddamento programmato che garantisce un congelamento progressivo e regolare.
Ricostituzione – Vedi scongelamento.

 

S

Sbilanciamento osmotico – Fenomeno che si verifica quando si forma ghiaccio all’interno della cellula e l’acqua tende a migrare al di fuori della cellula attraverso la membrana cellulare.
Scongelamento – Trattamento di riscaldamento per riportare le cellule dallo stato di quiescenza a quello di attività.

 

T

Temperatura di Conservazione – Più bassa è la temperatura di conservazione, più lungo è il tempo nel quale le cellule mantengono la loro vitalità inalterata. Questa temperatura dovrebbe essere di circa -130 °C.
Terreno nutritivo – Immediatamente dopo lo scongelamento la coltura deve essere trasferita in terreno nutritivo per minimizzare l’esposizione all’agente crioprotettivo usato per il congelamento.

 

V

Velocità di congelamento – Il tempo impiegato da una coltura a passare da temperatura ambiente a temperatura di congelamento. La velocità di congelamento consigliata è di 1 °C per minuto.
Vial – Fiala in vetro o plastica per la conservazione dei campioni congelati.
Vitalità – Misura della abilità di una coltura a moltiplicarsi ed a riprodursi.