Metodo orizzontale per la ricerca di Escherichia coli O157 – ISO 16654 (2001)

Preparare il campione secondo quanto previsto dall’ International Standard.

1) Arricchimento del campione omogeneizzato da analizzare in triptone soya broth con novobiocina (mTSB + N). Incubazione a 37°C ± 1°C per 6h e poi a 41,5 °C ± 1°C per successive 18-24h.

2) Concentrazione e separazione di E.coli O157 mediante biglie immunomagnetiche e lavaggio con buffer sterile.

3) Risospensione in 0,1 mL di buffer sterile

4) Inoculare 50 µL delle biglie lavate e risospese in un terreno selettivo per ottenere le colonie isolate: si utilizza il Tellurite cefixime sorbitol MacConkey agar (TC-SMAC) e a scelta un secondo terreno selettivo (incubazione a 37°C ± 1°C per 18-24h)

5) Prendere 5 colonie sorbitolo negative

6) Conferma mediante test biochimici.