Nota Applicativa Microbiologia N.7 – Monitoraggio Microbiologico superfici con le piastrine a contatto
• Introduzione
Le “piastrine contatto” sono piastrine in plastica che presentano due differenti terreni per microbiologia sulle due pareti. Normalmente sono impiegate per il conteggio microbico delle urine; in questa nota applicativa trovano impiego nel settore agro-alimentare. Grazie alla flessibilità del collegamento con il tappo di chiusura, possono essere facilmente fatte aderire alle superfici per il controllo dell’ igiene, facilitando la manualità dell’ operatore.
• I due terreni nutritivi
I due terreni nutritivi più utilizzati aderenti alle due pareti della piastrina sono il Plate Count Agar ed il TTC Rose Bengal Agar.
- Plate Count Agar
E’ un terreno non selettivo impiegato per la conta batterica totale. In presenza di TTC (trifenil tetrazolio cloruro) i microrganismi Gram-positivi e Gram-negativi si moltiplicano in colonie rosa-rosso.
- Rose Bengal Caf Agar
E’ un terreno selettivo usato per la numerazione di lieviti e muffe negli alimenti. L’indicatore Rosso Bengala facilita il riconoscimento ed il conteggio dei lieviti e delle muffe.
Questo terreno restringe le possibilità di moltiplicazione di Neurospora e Rizobi che facilmente potrebbero mascherare la moltiplicazione dei miceti a lenta moltiplicazione.
• Metodo
1. Svitare il tappo del recipiente cilindrico che contiene la piastrina con i due terreni nutritivi.
2. Evitare ogni contatto delle mani con la superficie dell’ agar.
3. A seconda della prova che si intende eseguire:
- far aderire la superficie del terreno nutritivo alla superficie in esame
- strisciare il tampone impiegato per prelevare il campione direttamente sulla superficie dell’ agar
- immergere la piastrina nel liquido in esame
4. Reinserire la piastrina nel contenitore, avvitare il tappo, trasferire in incubatore e mantenere a 37°C per 24 ore. Per la moltiplicazione dei lieviti, allungare la incubazione a 24/48 ore incubando a 25/30°C.
5. Al termine del periodo di incubazione controllare la moltiplicazione microbica su entrambi i lati della piastrina con i due terreni, utilizzando i disegni indicativi sotto riportati. Quando il campione ha un alto contenuto batterico, è necessario eseguire le diluizioni del prodotto in esame. Sarà in questo caso necessario risalire alla conta microbica
Caratteristiche morfologiche delle colonie
| MICRO-ORGANISMO | PLATE COUNT AGAR+TTC | ROSE BENGAL CAF AGAR |
| Escherichia coli | Colonie rosso mattone | Inibizione |
| Klebsiella | Colonie rosso mattone | Inibizione |
| Proteus | Colonie rosso mattone | Inibizione |
| Salmonella | Colonie rosso mattone | Inibizione |
| Enterobacter aerogenes | Colonie rosso mattone | Inibizione |
| Staphyloccus aureus | Colonie rosso mattone | Inibizione |
| Lieviti e muffe | Colonie rosse grandi con bordi irregolari | Rosa, bordi rotondeggianti, |
