Piastre a contatto per il controllo microbiologico ambientale Group B Streptococcus

Numerazione presuntiva di Escherichia coli. Enumeration of presumptive Escherichia coli

FIL-IDF 170A:1999

Preparare il campione secondo quanto previsto dall’ International Standard

Parte 1:
- Inoculo di tre provette di brodo selettivo (Lauryl sulphate tryptose broth).
- Incubare le provette a 37°C ± 1°C per 24-48h. Controllare le provette per monitorare la produzione di gas.
- Da ogni provetta in cui c’è stata produzione di gas, fare un passaggio in brodo in una provetta con EC brodo.
- Incubare a 44°C ± 1°C per 24h ± 3h. Controllare la produzione di gas nelle provette di EC.
- Da ogni provetta di EC in cui c’è stata produzione di gas fare un passaggio in brodo in acqua peptonata, la quale va controllata per la formazione di indolo.
- Determinazione del numero più probabile (most probable number -. MPN) di presunti Escherichia coli grazie alle tabelle del MPN. Questo numero viene calcolato in funzione delle provette di Lauryl sulphate tryptose e EC risultate positive alla produzione di gas e a quelle di acqua peptonata risultate positive alla formazione di indolo.

Parte 2:
- Inoculo di tre provette di brodo selettivo (Lauryl sulphate tryptose broth modificato con MUG).
- Incubare le provette a 30°C per 24-48h.
- Identificazione di quelle provette che presentano fluorescenza e formazione di indolo come possibili Escherichia coli.
- Identificazioni delle provette in cui vi è sviluppo di gas come positive per la presenza di coliformi.
- Determinazione del numero più probabile (most probable number -. MPN) di presunti Escherichia coli grazie alle tabelle del MPN. 
Parte 3:
- Filtrare una quantità precisa di campione da analizzare su delle membrane di cellulosa-acetato coprendola con glutammato agar, incubare a 37°C per 4h.
- Porre le membrane sulla superficie del terreno agar triptone-bile. Incubare a 44°C per 18-24h.
- Verificare la presenza di Escherichia coli attraverso la prova, su ogni colonia, della produzione di indolo.
- Calcolare ufc/g o mL di Eschericha coli, in base al numero di colonie risultate positive alla prove dell’indolo.